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3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤：

1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中，并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液（如Tris或者甘氨酸），可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算：蛋白质量（mg）/蛋白分子量（MW）＝蛋白质的毫摩尔数。

2. 在打开之前，平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中，加入足够量浓度的生物素，一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数，对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍，或者该***也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中

3. 室温30分钟，或冰上放置2小时。

4. 用30 ml PBS预洗纯化柱，上样，加入与欲收集量相同的缓冲液，收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。

碳酸氢钠是碳酸的单钠盐，具有碱化和电解质置换特性。解离后，碳酸氢钠形成钠离子和碳酸氢根离子。离子形成会增加血浆碳酸氢盐并缓冲过量的氢离子浓度，从而导致血液 pH 值升高。碳酸氢钠是一种白色结晶粉末，通常用作 pH 缓冲剂、电解质补充剂、全身碱化剂和局部清洁溶液。

甘氨酸（也称为 2-氨基）是一种氨基酸和***递质。身体自己产生甘氨酸，由其他天然生化物质合成，常见的是丝氨酸，还有和苏氨酸。我们也通过食物消耗甘氨酸。这种氨基酸存在于高蛋白食物中，包括肉类、鱼类、鸡蛋、乳制品和豆类。日常饮食通常包括约 2 克甘氨酸。

在胃肠道内，甘氨酸也起到代谢燃料的作用。需要制造胆汁、核酸、磷酸肌酸和卟啉，用于分解饮食中的营养物质。例如，它通过帮助产生胆汁酸来帮助分解脂肪，并帮助将糖原运输到细胞中，以 ATP 的形式用作能量。证据还表明，甘氨酸可以帮助稳定血糖水平，从而产生更持久的能量并防止对糖的渴望和疲劳。对大鼠进行的研究也有 证据表明“补充 L-谷氨酰胺和/或甘氨酸有利于大鼠结肠壁的修复，但 L-谷氨酰胺对结肠粘膜具有营养作用，似乎表现出更好的效果。”